viernes, 6 de diciembre de 2013

Terapia génica

Tiene como fundamento la inserción de genes funcionales en las células de un individuo y de los tejidos como tratamiento de una enfermedad.

 
Los avances científicos continúan evolucionando hacia la terapia genética, la medicina convencional, sin embargo es importante conocer que la técnica aún se encuentra en desarrollo, razón  por la cual su aplicación se lleva principalmente a cabo dentro de ensayos clínicos controlados, y para el tratamiento de enfermedades severas o bien de tipo hereditario o adquirido.
La mayoría de los estudios de terapia genética están dirigidos a cáncer y enfermedades hereditarias vinculadas a un defecto genético.

Entre los criterios para elegir este tipo de terapia se encuentran:
   -Enfermedad letal sin tratamiento.
   -La causa sea un único gen que esté ya clonado.
   -La regulación del gen sea precisa y conocida.

Para hablar de la terapia génica y su aplicación en la neumonía es necesario conocer que  el interferón conocido como gamma (IFN-γ) es una de las moléculas fundamentales en  la defensa ante multitud de patógenos respiratorios, además saber que los adenovirus producen una reacción de secreción local de INF-γ.


Con estos datos, el presente artículo discute que dosis diferentes de adenovirus transgénicos portadores del gen de TNF que provoca la liberación de INF-γ por parte del organismo tienen distintos resultados terapéuticos en el tratamiento de enfermedades respiratorias como neumonía siempre y cuando sean insertados con un control específico.

es.wikipedia.org/wiki/
www.news-medical.net/health/What-is-Gene-Therapy-(Spanish).aspx


domingo, 1 de diciembre de 2013

Ejemplo de trangénico utilizado en la neumonía

Investigadores españoles crean un ratón transgénico para estudiar la neumonía
Un equipo de científicos españoles han desarrollado ratones transgénicos que permitirán estudiar los efectos de virus como el de la neumonía atípica o SRAS (Síndrome Respiratorio Agudo Severo) y experimentar nuevas vacunas.
Un ratón transgénico es un animal al que se le ha modificado su ADN y por tanto su información genética. Frecuentemente estas modificaciones consisten en la introducción o en la eliminación de un gen (fragmento de ADN que codifica la información para producir una proteína). Mientras que insertando un gen de otro organismo podemos obtener ratones que producen proteínas que antes no producían, eliminando un gen saber qué función desempeñaba la proteína que codificaba.


 
CONCLUSIÓN:  
Ventajas:  
-Ha podido explicar que los ratones transgénicos se han hecho susceptibles a un coronavirus humano productor del resfriado común en personas con un sistema inmune normal y de neumonías en personas inmunodeprimidas. 
-Este modelo animal también permite evaluar la eficacia y bioseguridad de un vector para vacunas y terapia génica.

Desventajas: La introducción de una nueva información genética (el transgén) dentro del genoma de un organismo puede presentar algunos problemas en relación a dónde y cuándo expresar el transgén, tal como se indica a continuación:
-Integración múltiple (en tándem o no)
-Lugar de integración indeterminado (efecto de posición)
-Metilación y falta de expresión

Ref: http://scielo.sld.cu/scielo.php?pid=S0034-74932004000200010&script=sci_arttext

domingo, 24 de noviembre de 2013

ADN Recombinante Neumonía

Neumonía puede ser una causa secundaria de la deficiencia de alfa 1 antitripsina.
En varias investigaciones realizadas se comprobó la existencia de una levadura productora de alfa 1-antitripsina recombinante (rAAT), la misma que desempeña un papel de gran importancia como antielastasa normal pero se encuentra asociada a una filtración renal alta, el empleo de esta enzima recombinante evita la administración intravenosa crónica. rAAT se administró directamente en los pulmones en forma de aerosol, después de la administración las defensas contra la elastasa de los neutrófilos aumentaron considerablemente y no se observaron efectos adversos.

PspA, una proteína de superficie de Streptococcus pneumoniae 
Corresponde a un factor de virulencia, inmunogénica y común a todos los serotipos la PspA contiene epitopes conservados de manera tal que la inmunización genera protección contra neumococos pertenecientes a diversos tipos capsulares y con distintas PspA. Esta información podría ser un valioso aporte para la formulación de una vacuna efectiva utilizando PspA recombinante como inmunógeno.Empleando la tecnología del DNA recombinante permite la producción in vivo de bioconjugados en E. coli. La plataforma permite el diseño y producción controlada de glicoproteínas con una estructura de polisacárido a medida, que se dirigirá a los patógenos bacterianos que no pueden ser tratados con procesos químicos existentes.

 
Fuente: 



jueves, 14 de noviembre de 2013

ADN Recombinante en la Naturaleza

ADN recombinante constituyen moléculas que se construyen fuera de las células vivientes juntando segmentos de ADN sintético o natural

 


Características:
·  Pueden replicarse en una célula viviente, hoy en día es posible crear moléculas recombinantes entre segmentos de ADN que no tengan homología y también pueden proceder de diversos organismos.
·  Es posible aislar las secuencias de ADN de un organismo y pasarlo al otro con una adecuada dosis de enzimas de restriccion y vectores moleculares

Ejemplos:
1.Reproducción sexual el ADN de los progenitores se combina de forma natural manifestándose como una mezcla de características en los descendientes.




domingo, 10 de noviembre de 2013

Técnicas de hibridación

MICROARRAY
Constituyen pequeños soportes sólidos, donde secuencias de miles de genes diferentes están inmovilizados o fijos. Los soportes son portaobjetos de vidrio, pero también puede ser chips de silicio o membranas de nylon. El ADN se imprime o realmente es sintetizado directamente sobre el soporte.

 
                                Fig.1 Microarray 


¿Por qué utilizarlos en la Neumonía
En relación a la Neumonía, la técnica del microrray constituye una herramienta de mucha importancia y utilidad ya que se la puede aplicar para determinar la resistencia bacteriana a cierto tipo de antibióticos, mostrando una correlación entre la resistencia fenotípica y la presencia de genes de resistencia.
Según varios estudios realizados se puede confirmar que la técnica de hibridación de microarrays constituye una alternativa de gran valor en relacion con técnicas de tipificacion convencionales, proporcionando características adicionales que son complementarias a la caracterización de las cepas.

ref: 


viernes, 1 de noviembre de 2013

PCR

Evaluación de una PCR anidada en pacientes pediátricos para diagnóstico de neumonía neumocócica adquirida en la comunidad

Objetivo: evaluar la utilidad de un método simplificado para extracción de ADN, acoplado a un protocolo de PCR anidada, basada en la amplificación de fragmentos del gen de la neumolisina para el diagnóstico de neumonía neumocócica en niños con evidencias clínicas y radiológicas de infección bacteriana.
Muestra Biológica: sangre
Extracción de ADN bacteriano
*LISIS: salina al 0,8 % y se incubó por 2 horas a 37º C, proteinasa K 0,2 mg y 20 μL de SDS 10 %.
*SEPARACIÓN: 400 μL de Chelex-100 al 5 % y se calentópor 10 minutos a 95ºC
Gen de la neumolisina
Especificidad analítica in vitro y la sensibilidad: (10 UFC/ml)
PCR anida
*DESNAT:: 1 min a 94º C
*HIBRID: 30 s a 55º C
*EXTENC: 1 min a 72º C
Visualización: Electroforesis en gel de agarosa 
http://www.scielo.org.ar/scielo.php?pid=S0325 75412005000400004&script=sci_abstract

domingo, 27 de octubre de 2013

Extracción de adn


Perfiles genéticos y patrones de resistencia en aislamiento de M. tuberculosis de pacientes con tuberculosis pulmonar. Lima Sur, Perú.
Objetivo:
Conocer los perfiles genéticos de M. Tuberculosis y determinar el patrón de resistencia a drogas en uan población de sujetos infectados provenientes del Sur de Lima mediante el marcador genético IS6110 (RFLP-IS6110).

-Extracción de ADN genómico.
-Restricción enzimática y transferencia de ácidos nucleicos.
-Hibridación con la sonda 245pb-IS6110 y obtención de los perfiles genéticos RFLP-IS6110.
Resultados:
De 118 aislamientos de M. Tuberculosis se identificaron 97 perfiles genéticos variando entre 2 y 15 bandas por perfil. El 29.7 de los aislamientos dio origen a 14 grupos o clusters genéticos mientras que el resto mostró patrones variables de bandas. De otro lado, los perfiles de resistencia revelaron cerca de 33% de los sujetos participantes nunca tratados presentaron resistencia a drogas y 58% de los tratados con anterioridad. La multidrogoresistencia fue de 8.24% y 36% en los que nunca y anteriormente tratados respectivamente. 
Conclusiones: 
El análisis revela la existencia de grupos genéticos con relación epidemiológica o clonal sin evidencia de transmisión de cepas resistentes a múltiples drogas. 
Sugerencia:continuar con este tipo de investigaciones de epidemiología molecular, que nos permita caracterizar la diversidad clonal de las cepas provenientes de diferentes zonas, así como definir grupos de perfiles genéticos asociados a transmisión.


domingo, 20 de octubre de 2013

RELACIÓN ENTRE LA TRADUCCIÓN Y LA NEUMONÍA

En los últimos años, se ha producido un incremento de la resistencia microbiana sobre todo en diferentes patógenos de tipo respiratorio, lo que dificulta proporcionar el antibiótico adecuado.
-La evolución bacteriana ha permitido la transferencia de genes mutados, para lo cual se produce la traducción de diferentes proteínas y enzimas

Es así que la producción bacteriana de B-LACTAMASAS de espectro extendido (BLEEs)  constituye un problema significativo ya que afecta a la eficiencia de los tratamientos, la  presencia de estas enzimas es la causa más importante de la resistencia a los agentes  microbianos B lactámicos, por lo cual se modifica  las proteínas PBP de la pared celular          confiriéndole gran resistencia a la penicilina.
SHV (SULFHYDRYL VARIABLE): son beta lactamasas plasmídicas, un ejemplo:

-SHV5 Es una enzima plasmídica mutante que presenta varias sustituciones estos cambios son   responsables de su incremento en su espectro de acción

Streptoccocus Neumoniae
Se produce la resistencia a macrólidos y azálidos a través de la metilación del sitio diana en el ribosoma codificado por el gen erm (b)
 Resistencia a las fluoroquinolonas
Se produce por mutaciones expontáneas en la región del genoma conocido como región determinante de resistencia a quinolona
  1. Las mutaciones en el gen gyra
  2. Las mutaciones en par C  

domingo, 13 de octubre de 2013

relacion de la transcripción con la Neumonía

Una alteración en la transcripción genética incrementa la resistencia bacteriana frente a algunos antibióticos, lo cual se identifica mediante 3 receptores ubicados en su superficie provocando un cambio en la trascripción de diferentes genes implicados en modificar la estructura bacteriana, incrementando la expresión de la cápsula 

La transcripción del  gen gyrA  codificador de la  subunidad A de la DNA girasa de S. Pneumoniae  
  1. Se inicia en el  extremo 3' terminal de la región -10 extendida y a 30 pb del codon de iniciación de traducción. 
  2. La región que contiene el promotor de gyrA tiene una curvatura intrínseca y la curvatura parece actuar como un represor por su puesto que su presencia disminuye la eficiencia de transcripción.
  3. La transcripción de gyrA tiene un promotor independiente, y es estimulada por la relajación del DNA, lo que se denomina respuesta RST (estimulación de la transcripción mediada por relajación) que depende de la  curvatura intrínseca.

domingo, 6 de octubre de 2013

Relación de la Transcripción con la Neumonía

Una alteración en la transcripción genética incrementa la resistencia bacteriana frente a algunos antibióticos, lo cual se identifica mediante 3 receptores ubicados en su superficie provocando un cambio en la trascripción de diferentes genes implicados en modificar la estructura bacteriana, incrementando la expresión de la cápsula 

La transcripción del  gen gyrA  codificador de la  subunidad A de la DNA girasa de S. Pneumoniae  
  1. Se inicia en el  extremo 3' terminal de la región -10 extendida y a 30 pb del codon de iniciación de traducción. 
  2. La región que contiene el promotor de gyrA tiene una curvatura intrínseca y la curvatura parece actuar como un represor por su puesto que su presencia disminuye la eficiencia de transcripción.
  3. La transcripción de gyrA tiene un promotor independiente, y es estimulada por la relajación del DNA, lo que se denomina respuesta RST (estimulación de la transcripción mediada por relajación) que depende de la  curvatura intrínseca.

domingo, 29 de septiembre de 2013

Genómica de la Neumonia

Replicación: 
Ocurre en el núcleo, la proteína viral (TP) actúa como primer o cebado, otras dos proteínas más codificadas por el virus participan en la replicación: Ad DBP y Ad DNA pol. 
Además tenemos proteínas celulares en el núcleo que participan en la replicación del genoma viral. Se producen además durante la replicación viral las siguientes proteínas:
  • Proteínas tempranas inmediatas: E1A.
  • Proteínas tempranas: E1B, E2A, E2B, E3, E4.
  • Proteínas tardías: proteínas virales.
Coranovirus ( NEUMONIA ATIPICA)
La replicación de los Coronavirus comienza con la entrada a la célula, momento en que pierde su envoltura y el genoma de ARN es depositado en el citoplasma
El genoma del coronavirus tiene un capucha metilada (CAP) en el extremo 5', y una cola poliadenilada (poly A) en el extremo 3', dándole un gran parecido al ARN mensajero del hospedador. Esto permite que el ARN se adhiera a los ribosomas para su traducción. Los coronavirus tienen también una proteína conocida como replicasa codificada en su genoma permitiendo que el ARN viral sea traducido con la maquinaria del mismo hospedador. Esta replicasa es la primera proteína que es sintetizada puesto que una vez el gen que codifica la replicasa es traducido, el proceso se detiene por un codónde parada.

domingo, 22 de septiembre de 2013

¿Qué es la Neumonía?

La neumonía una de las afecciones de salud con mayor indice de frecuencia en la población ecuatoriana , es una inflamación de los pulmones, que se caracteriza por la multiplicación de microorganismos en el interior de los alvéolos, puede ser causada por diferentes tipos de bacterias, hongos o virus, los mismos que provocan una infección e inflamación con daño pulmonar, se presenta de manera leve, grave o incluso llega a causar la muerte del individuo que la padece, esto esta directamente relacionado con algunos factores que influye directamente como son la salud del paciente, su edad y principalmente el tipo de microorganismo causante 


 

domingo, 15 de septiembre de 2013

BIENVENIDOS

Un saludo cordial a todos, este blog estará destinado a compartir información sobre una de las enfermedades con mas alto indice de mortalidad en el ecuador y en algunos países del mundo, la NEUMONÍA, un padecimiento bastante común en la sociedad actual, siendo la población mas suceptible los adultos mayores y niños, sin lugar a duda un tema de gran importacia que deberia ser de nuestro conocimiento para asi prevenirla a demas de poner identificarla de manera oportuna para que no llegue a ser mortal. 




ref. 1 http://www.youtube.com/watch?v=tC5vV6iy6_s
ref. 2 http://www.youtube.com/watch?v=LzkMr8f71Lg