Extracción de adn

Perfiles genéticos y patrones de resistencia en aislamiento de M. tuberculosis de pacientes con tuberculosis pulmonar. Lima Sur, Perú.

Objetivo:

Conocer los perfiles genéticos de M. Tuberculosis y determinar el patrón de resistencia a drogas en uan población de sujetos infectados provenientes del Sur de Lima mediante el marcador genético IS6110 (RFLP-IS6110).

-Extracción de ADN genómico.

-Restricción enzimática y transferencia de ácidos nucleicos.

-Hibridación con la sonda 245pb-IS6110 y obtención de los perfiles genéticos RFLP-IS6110.

Resultados:

De 118 aislamientos de M. Tuberculosis se identificaron 97 perfiles genéticos variando entre 2 y 15 bandas por perfil. El 29.7 de los aislamientos dio origen a 14 grupos o clusters genéticos mientras que el resto mostró patrones variables de bandas. De otro lado, los perfiles de resistencia revelaron cerca de 33% de los sujetos participantes nunca tratados presentaron resistencia a drogas y 58% de los tratados con anterioridad. La multidrogoresistencia fue de 8.24% y 36% en los que nunca y anteriormente tratados respectivamente. 

Conclusiones: 

El análisis revela la existencia de grupos genéticos con relación epidemiológica o clonal sin evidencia de transmisión de cepas resistentes a múltiples drogas. 

Sugerencia:continuar con este tipo de investigaciones de epidemiología molecular, que nos permita caracterizar la diversidad clonal de las cepas provenientes de diferentes zonas, así como definir grupos de perfiles genéticos asociados a transmisión.

RELACIÓN ENTRE LA TRADUCCIÓN Y LA NEUMONÍA

En los últimos años, se ha producido un incremento de la resistencia microbiana sobre todo en diferentes patógenos de tipo respiratorio, lo que dificulta proporcionar el antibiótico adecuado.

-La evolución bacteriana ha permitido la transferencia de genes mutados, para lo cual se produce la traducción de diferentes proteínas y enzimas

Es así que la producción bacteriana de B-LACTAMASAS de espectro extendido (BLEEs)  constituye un problema significativo ya que afecta a la eficiencia de los tratamientos, la  presencia de estas enzimas es la causa más importante de la resistencia a los agentes  microbianos B lactámicos, por lo cual se modifica  las proteínas PBP de la pared celular          confiriéndole gran resistencia a la penicilina.
SHV (SULFHYDRYL VARIABLE): son beta lactamasas plasmídicas, un ejemplo:

-SHV5 Es una enzima plasmídica mutante que presenta varias sustituciones estos cambios son   responsables de su incremento en su espectro de acción

Streptoccocus Neumoniae

Se produce la resistencia a macrólidos y azálidos a través de la metilación del sitio diana en el ribosoma codificado por el gen erm (b)

 Resistencia a las fluoroquinolonas

Se produce por mutaciones expontáneas en la región del genoma conocido como región determinante de resistencia a quinolona

1. Las mutaciones en el gen gyra
2. Las mutaciones en par C  

relacion de la transcripción con la Neumonía

Una alteración en la transcripción genética incrementa la resistencia bacteriana frente a algunos antibióticos, lo cual se identifica mediante 3 receptores ubicados en su superficie provocando un cambio en la trascripción de diferentes genes implicados en modificar la estructura bacteriana, incrementando la expresión de la cápsula 

La transcripción del  gen gyrA  codificador de la  subunidad A de la DNA girasa de S. Pneumoniae  

1. Se inicia en el  extremo 3' terminal de la región -10 extendida y a 30 pb del codon de iniciación de traducción. 
2. La región que contiene el promotor de gyrA tiene una curvatura intrínseca y la curvatura parece actuar como un represor por su puesto que su presencia disminuye la eficiencia de transcripción.
3. La transcripción de gyrA tiene un promotor independiente, y es estimulada por la relajación del DNA, lo que se denomina respuesta RST (estimulación de la transcripción mediada por relajación) que depende de la  curvatura intrínseca.

Relación de la Transcripción con la Neumonía

Una alteración en la transcripción genética incrementa la resistencia bacteriana frente a algunos antibióticos, lo cual se identifica mediante 3 receptores ubicados en su superficie provocando un cambio en la trascripción de diferentes genes implicados en modificar la estructura bacteriana, incrementando la expresión de la cápsula 

La transcripción del  gen gyrA  codificador de la  subunidad A de la DNA girasa de S. Pneumoniae  

1. Se inicia en el  extremo 3' terminal de la región -10 extendida y a 30 pb del codon de iniciación de traducción. 
2. La región que contiene el promotor de gyrA tiene una curvatura intrínseca y la curvatura parece actuar como un represor por su puesto que su presencia disminuye la eficiencia de transcripción.
3. La transcripción de gyrA tiene un promotor independiente, y es estimulada por la relajación del DNA, lo que se denomina respuesta RST (estimulación de la transcripción mediada por relajación) que depende de la  curvatura intrínseca.